Des méthodes colorimétriques sont décrites pour la détermination de l'acide ascorbique (AA) et de la phosphatase alcaline (ALP). Les deux tests reposent sur l’inhibition de l’activité analogue à la peroxydase (POx) des nanocubes de bleu de Prusse (PB NC) coiffés d’acide citrique. Ils catalysent l'oxydation de la 3,3,5,5-tétraméthylbenzidine (TMB) par H2O2 pour produire une couleur bleue avec un maximum d'absorption à 652 nm. En ajoutant AA, les PB NC sont réduites au blanc de Prusse (PW) qui n’agit pas comme un imitateur de POx. Il en résulte une diminution du taux de formation de la coloration bleue dont l'intensité diminue avec l'augmentation de la concentration en AA. Le test permet de quantifier AA avec une limite de détection de 35 nM (à 3 s / m). L'hydrolyse du phosphate AA par l'ALP conduit à la formation d'AA qui peut être quantifiée par le procédé ci-dessus. Sur cette base, l’activité de la PAL peut être déterminée par la mesure de l’intensité de la coloration bleue ainsi formée. La méthode peut être utilisée pour déterminer l'activité de l'ALP avec une limite de détection aussi basse que 0,23 U.L (-1). Résumé graphique Présentation schématique d'une méthode de détermination colorimétrique de l'activité de la PAL. L'AA obtenu par l'hydrolyse catalysée par l'ALP du phosphate d'acide ascorbique (AAP) inhibe l'activité intrinsèque analogue à la peroxydase des PB NC en réduisant les nanocristaux de bleu de Prusse (PB NC) pour former un blanc de Prusse (PW) inactif.
Source: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30666555