Le cartilage articulaire est un tissu avasculaire ayant une propriété régénérative limitée. Par conséquent, un défaut ou un traumatisme du cartilage articulaire dû à une maladie ou à un accident peut entraîner une détérioration progressive des tissus. L'ingénierie des tissus cartilagineux, en remplaçant le tissu cartilagineux défectueux, est une méthode pour réparer un tel problème. Dans cette recherche, trois aspects principaux - les cellules, l'échafaudage de biomatériau et les facteurs bioactifs - qui soutiennent les études d'ingénierie tissulaire ont été optimisés. Les cellules souches mésenchymateuses dérivées du tissu adipeux (ADSC) qui deviennent du cartilage ont été cultivées dans un milieu de croissance optimisé complété par du plasma riche en plaquettes (PRP) ou de l'acide L-ascorbique (LAA). En tant que résultat de la caractérisation, les ADSC utilisés dans cette expérience pourraient être classés en cellules souches mésenchymateuses (MSC) sur la base d'une analyse de multipotence et d'une analyse de marqueur de surface cellulaire. L’échafaudage de biomatériau a été fabriqué à partir du cocon Bombyx morii en utilisant la fibroïne de soie par un procédé de lixiviation au sel et a été conçu pour former des pores de différentes tailles afin de fournir un support optimisé à l’adhérence et à la croissance des cellules. L'évaluation de la biocompatibilité et de la cytotoxicité a été réalisée à l'aide d'un test au MTT afin d'optimiser la concentration de fibroïne de soie et la taille des pores. Les ADSC caractérisés ont été cultivés sur un échafaudage optimisé. LAA et PRP ont été choisis comme facteurs bioactifs pour induire la différenciation des ADSC en chondrocytes. L'optimisation de la concentration de LAA et de PRP a été analysée par prolifération cellulaire en utilisant le test MTT et la différenciation chondrogénique en mesurant le glycosaminoglycane (GAG) en utilisant du bleu d'Alcian à 605 nm de longueur d'onde. La concentration optimale en fibroïne de soie, la taille des pores, la concentration de LAA et la concentration de PRP ont été utilisées pour développer et différencier les ADSC caractérisés pendant 7, 14 et 21 jours. La morphologie des cellules sur le support a été analysée à l'aide d'un microscope électronique à balayage (MEB). Les résultats ont montré que l'ADSC pouvait adhérer sur du plastique, exprimer des marqueurs de surface cellulaire spécifiques (CD73, CD90 et CD105) et pouvait être différencié en trois types de cellules matures. L’échafaudage de fibroïne de soie fabriqué à partir d’une concentration de 12% p / v a formé un diamètre de pore de 500 micromètres (analyse SEM), et il a été démontré par l’analyse au MTT qu’il était biocompatible et facilitait la croissance cellulaire. Les concentrations optimales des facteurs bioactifs LAA et PRP étaient respectivement de 50 µg / mL et 10%. L'analyse GAG avec la coloration au bleu alcian a suggéré que le milieu d'induction PRP et le milieu d'induction LAA sur un échafaudage à 12% p / v pourraient promouvoir efficacement non seulement l'adhérence et la prolifération cellulaires, mais également la différenciation chondrogénique de l'ADSC dans les 21 jours de culture. Par conséquent, cette étude fournit une nouvelle approche de l'ingénierie des tissus articulaires avec une combinaison d'ADSC en tant que source cellulaire, de LAA et de PRP en tant que facteurs bioactifs et de la fibroïne de soie en tant qu'échafaudage biocompatible et biodégradable.
Source: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30488014